Localización
- Edificio de apoio á investigación (CACTUS)
- Rúa de Constantino Candeira, 1. Campus Vida , 15782Santiago de Compostela
- Teléfonos
- 881 816 242
Técnica empregada para a determinación de masa molecular onde se obtén o espectro xeral da mostra no rango de masas analizado. Pódese realizar medidas en modo lineal (baixa resolución) ou modo reflector (alta resolución, rango de masas 50-4000 Da); con polaridade positiva ou negativa.
As mostras enviaranse sólidas ou en disolución nun vial etiquetado co seu código identificativo, e ter unha concentración axeitada segundo a seguinte táboa:
Táboa: guía de concentración das mostras para MALDI
|
CONCENTRACIÓN NECESARIA PARA ANÁLISIS MALDI |
|
|
MW (Da) |
µg/ml |
|
500 |
10-25 |
|
1.000 |
20-50 |
|
2.500 |
50-130 |
|
5.000 |
100-250 |
|
10.000 |
200-500 |
|
20.000 |
400-1.000 |
|
>20.000 |
>1.000 |
Convén non empregar disolventes como DMSO ou DMF, e evitar a presenza de sales que poden interferir na mostra (NaCl, NaOAc...). No caso de que a mostra teña sales, pódese realizar un desalgado previo (servicio facturable) co “Desalgado Zip-Tip”.
As mostras a analizar serán mesturadas con unha matriz orgánica segundo o protocolo estándar da Unidade e depositada na superficie metálica da placa MALDI. No caso de que se necesite medir as mostras noutras matrices, distintas ás habituais das que dispón a Unidade, ou si se precisa dun protocolo específico de preparación, o usuario debe indicalo no apartado de “Observacións” do Formulario de Solicitude de Servicio ou poñerse en contacto coa Unidade.
Matrices:
As matrices empréganse dependendo do tipo de analito a medir, podendo ser necesario á adición de algún tipo de aditivo. As matrices e aditivos coas que conta a Unidade actualmente, e que son as máis habituais en MALDI, son as seguintes:
|
Matrices: Nome |
Abreviatura |
Aplicacións |
|
Ácido α-ciano-4-hidroxicinámico |
HCCA |
Péptidos Proteínas (< 5 KDa) |
|
Ácido sinapínico |
SA |
Proteínas (10-150 KDa) Péptidos (> 3 KDa) |
|
Ácido 2,5-dihidroxibenzoico |
DHB |
Péptidos Proteínas Polímeros Hidratos de carbono Lípidos/Glicolípidos |
|
1,8,9-trihidroxiantraceno (Dithranol) |
DIT |
Polímeros non polares |
|
Trans-2-[3-(4-tert-Butilfenil)-2-metil-2-propenilideno]malonitrilo |
DCTB |
Analitos non polares |
|
3-Hyproxy picolinic acid |
HPA |
Oligonucleótidos |
|
2,6-Dihydroxyacetophenone |
DHAP |
Proteínas intactas |
|
1,5-Diaminonaphthalene |
DAN |
Proteínas intactas |
|
Aditivos: Nome |
Abreviatura |
Aplicacións |
|
Silver Nitrate |
AgNO3 |
Axente catiónico |
|
Silver Trifluoroacetate |
AgTFA |
Axente catiónico |
|
Sodium Trifluoroacetate |
NaTFA |
Axente catiónico |
|
Sodium iodide |
NaI |
Axente aniónico |
|
Sodium chloride |
NaCl |
Axente aniónico |
Para outro tipo de matrices, por favor contactar coa Unidade.
Aínda que os equipos empregados en MALDI poden adquirir espectros en Alta Resolución (modo Reflector), non realizan a Medida de Masas Exactas, xa que non é unha técnica axeitada para ese servizo adicional. Polo contrario, pódese facilitar ó usuario unha comparativa visual do pico experimental co teórico da fórmula facilitada, pero sen os datos estatísticos da MME.
Instrumentación: Autoflex (Bruker), Ultraflex III (Bruker).
Unidade de Espectrometría de Masas e Proteómica
- Edificio de Apoio á Investigación (CACTUS)
- Rúa de Constantino Candeira, 1. Campus Vida , 15782Santiago de Compostela
- 881 816 242